能够将聚核苷酸链的 磷酸二酯键切断的酶，称为核酸酶。核酸酶属于水解酶，作用于磷酸二酯键的P-O位置。  

核酸酶是在核酸分解的第一步中，作用于 水解核苷酸之间的磷酸二酯键的一种核酸。在高等动植物中都有作用于磷酸二酯键的。  

不同来源的核酸酶，其专一性、作用方式都有所不同。有些核酸酶只能作用于RNA，称为 核糖核酸酶（ RNase），有些核酸酶只能作用于DNA，称为 脱氧核糖核酸酶（ DNase），有些核酸酶专一性较低，既能作用于RNA也能作用于DNA，因此统称为核酸酶（nuclease）。根据核酸酶作用的位置不同，又可将核酸酶分为 核酸外切酶（exonuclease）和 核酸内切酶（endonuclease）。