1974年,高秀敏到当地的民间团体唱二人转。1982年,高秀敏进入扶余市民间艺术团做演员,并在1986年获国家二级演员职称。1992年辞职做个体演员,开始出演小品,并屡次在春节联欢晚会和
赵本山搭档表演。2001年,在电视剧《
刘老根》中饰演主要人物“丁香”。2002年,和赵本山、
范伟合作,以小品《
卖车》获得央视春晚一等奖;同年在电视剧《
刘老根2》中饰演丁香。2003年,和赵本山、范伟合作,以小品《
心病》获得央视春晚一等奖;同年在电视剧《
风筝奇缘》中饰演大夫人。2004年,和赵本山、范伟合作,以小品《
送水工》获得央视春晚一等奖;同年在电视剧《
水兵俱乐部》中饰演陶母。2005年初,由高秀敏主演,
何庆魁、高秀敏夫妇共同担任制片人的电视剧《
圣水湖畔》于中央电视台综合频道(CCTV-1)播出。
2005年8月18日凌晨4时,高秀敏突发心脏病,在长春市深圳街华侨村名人公寓1号楼去世,享年46岁。