室町幕府（1336年-1573年），名称源自于 幕府设在 京都的室町，又称 足利幕府。由南北朝时代 足利尊氏1336年建立幕府开始，结束于1573年织田信长废除将军 足利义昭。1336年（延元元年，建武三年）足利尊氏在京都室町建立了武家政权。此后两个朝廷对立的 南北朝时代。明德三年（1392年）闰十月，南朝的 后龟山天皇还幸京都，向北朝的 后小松天皇进行让国仪式，授予神器，实现两朝的合一。如此室町幕府成为支配全国的统一政权。

室町幕府执政时期，由强大的守护大名任“管领”等要职辅佐将军。室町幕府在行政方面由将军总理一切政务。其下设“ 管领”，以辅佐将军，一般由足利氏一族的斯波、 细川、畠山三氏轮流担任，谓之“ 三管领”。管领之下有 侍所、 问注所，政所等机构，而以侍所最为重要。

在八代将军 足利义政任期内 应仁之乱与 细川政元的政变之后，日本各地大名豪族互相征伐兼并土地，不再听从幕府号令，室町幕府势力衰弱。 应仁之乱开始日本进入了举国混战的 战国时代。虽然战乱持续，但内外通商繁盛，农业、工业技术也有所提高。1573年（天正元年），第十五代将军 足利义昭被 织田信长驱逐出京师，室町时代结束。

概述图为室町幕府足利将军家纹“二引两”。